指定无菌处理的非活性颗粒监测
无菌处理和NVP持续监测
从历史上看，疫苗生产占无菌生产的很大一部分。近年来，人们越来越关注新的生物疗法，其中大多数是通过注射或静脉注射给药。大型制药公司正在投资推动这些新的生物制剂的开发和发布。这些产品大部分将采用无菌工艺生产1。
连续非活粒子监测(NVP)，如果配置得当，可以提供关于无菌环境变化的有用信息，每分钟更新计数种群和趋势，捕捉污染事件，从而识别和量化风险(即非零结果)。1。
FDA和EU都特别提到在无菌处理过程中对NVP进行持续监测，以实现实时事件检测。
实施新vp系统时的主要考虑事项
确定污染事件的风险，以确定监测位置
传统上，灌装操作在三个位置进行监控:(1)无菌容器进入A级时，(2)灌装点，以及(3)打开和灌装的容器在加盖前暴露的地方。这是足够的小，紧凑的灌装作业。然而，在决定是否需要增加监测地点时，还应考虑以下潜在风险:
- 人类进入A级区域的入口。例如，装载塞子，清理破损的小瓶，维护门等。
图1所示。NVP在清晰的隔离屏障内监视料斗
- 单向流干扰。在无菌产品暴露之前，偏离有关配置/装载系统的标准操作规程可能是一个风险。一些系统的设备可以在生产前活动或重新配置生产线时置于无菌产品上方。
- 移动机器人。失效的轴承或密封件会产生颗粒。移动机器人产生的空气湍流可以将这些颗粒输送到无菌产品中。
- 可重构。对于指定的过程，没有正确定位的设备或访问门/端口可以为无菌产品的颗粒提供访问点。
图2。在线路配置点取样
- 来自包装部件的颗粒。如果组件在装载操作时破裂或溢出，可能会产生颗粒进入无菌产品。
- 电源或设备故障。在暂时没有气流的情况下，可能需要额外的监测点来验证无菌产品在这些事件中没有暴露在污染中。（注意:NVP系统可以起到验证环境控制在这些事件中没有丢失的作用，因为确保NVP系统的持续供电相对容易且负担得起。)
了解工作流程
重要的是要仔细审查媒体填充研究和后续工作流程，以帮助确定所需的监测过程步骤和所需的报告内容。大多数无菌过程是批处理工作流程，可以有许多步骤。例如，当液体填充操作中的NVP监控时，可以采用以下部分或全部工作流程步骤:
- 行配置。在此步骤中不需要监视。
- 行清洁/消毒
- 空气微粒计数器在此过程中不应摄入液体清洗剂。应停止通过传感器的气流，并对等速样品探针盖上盖子或以其他方式保护，以免收集腐蚀性清洗剂，如醋酸或漂白剂，这些清洗剂会污染或损坏颗粒传感器中的光学器件。
- 粒子传感器验证(通常称为“零计数”)
环境消毒后，颗粒传感器应使用绝对吹扫过滤器进行测试，或在环境静止时进行测试。这确保了在线路配置过程中，在等速探针中收集到的任何剩余的液体蒸汽或颗粒都能从传感器中清除，从而确保测试数据中不包含虚假计数。操作员可以监测粒子计数，直到它们在几分钟内变为零。(注:大多数现代无菌加工区域在静止状态下，0.5微米处会产生零颗粒。) - 环境“静止”测试
这是一个规定长度的采样周期(例如36分钟)，在无菌产品暴露之前，用颗粒计数器采样。使用环境“静止”规范的下限设置的限制激活警报。目的是在无菌产品暴露前验证环境符合规范。该测试验证环境正在产生最清洁的空气。如果发生报警，在暴露无菌产品和开始批处理之前，可能需要自动复测或主管批准。 - 批量监控“运行中”
这是无菌产品在生产活动中暴露于环境的时期。警报限值设置为检测本文前面讨论的污染事件，这意味着警报级别设置为低于ISO 14644中0.5微米颗粒的“运行中”限值。先进的NVP系统可以自动将在此期间收集的数据标记为Batch ID，以便于生成产品发布的批次报告。在此期间的告警确认可以捕获操作员的“告警原因”，以便进行根本原因调查。
图3。批处理工作流内置于监控软件
- 批暂停/干预
一些NVP系统允许在管线干预期间暂停批量数据收集。如果生产线被停止，例如为了清理破碎的小瓶，无菌产品被覆盖或以其他方式保护，那么颗粒计数器将继续采样以进行QA，但警报可以禁用，计数记录将从批放行报告中排除-但仅在批处理恢复之前。这仅适用于无菌产品在干预过程中未暴露(即暴露/损坏的容器被处置)。众所周知，人为干预会产生高于正常水平的颗粒，暴露的产品应该丢弃。在介质填充研究期间，应明确干预措施、任何补救性灭菌/清洗以及相关的产品风险的SOP。 - 洗澡完成
批量完成后，NVP系统自动生成批量数据报告，并带有批量告警，供审核和审批。
确定由谁来控制和审查监控过程
在过去，NVP对无菌过程的监控主要是一项人工任务，通常由QA或微生物学人员与生产人员一起在无菌区操作。
在使用自动化NVP监测的现代无菌环境中，大部分监测过程由计算机控制。这减少了监测错误的机会和/或在无菌产品暴露期间，无菌区不需要QA或微生物人员。现在可以在无菌区之外远程控制监控，也可以由生产人员使用简单、无差错的单按钮流程来控制颗粒计数器并定义工作流程。
减少无菌区人员是NVP自动化监测系统的主要优势之一。就像隔离器和RABS减少或消除A级环境中的人员一样，自动化NVP监控减少了B级环境中对人员的需求。在某些环境中，一个B级操作员可以支持大型填充/精加工作业。过程的监督是由控制室完成的，控制室监视所有设备和过程。
因此，大多数现代NVP自动化监控系统利用“客户端和服务器”系统，具有多个客户端接口，用于不同的职责，例如执行监控、监督监控、确认警报或审查和批准批处理结果。主系统软件位于网络某处的服务器(或虚拟机)上。客户端系统应考虑承担以下职责:
- 操作符。这是B级无菌区开始/停止监测、输入批编号并进行干预的人员。
图4。B级操作员工作站
- 报警确认。这可能是B级区域的操作员，也可能是办公室或控制室的主管或微生物专业人员。警报通知可以通过电脑客户端、B级灯/蜂鸣器或电子邮件和短信宣布。
- 监测结果的审查员和/或审批人。这通常由主管执行。一旦产品批次/批次完成，批次报告必须审查、调查和批准。如果发生了警报，主管人员也可能希望实时监控该过程。
图5。ie浏览器查看管理员告警界面
每一项任务都需要客户端计算机或软件。每个组织的运作方式略有不同，因此涉及的客户/人员数量也会有所不同。
定义审计“客户”和需求
政府监管部门总有可能对过程和监测数据进行审计。通常，多个法律实体将对该过程进行审计，每个实体的要求略有不同。
购买无菌产品的客户通常有基于其内部QA标准的独特审核要求。如果涉及到新客户，在设计监控系统时，最好检查他们的独特需求。
大多数无菌制造商都有内部审核员和要求，试图协调各种法规和客户要求。如果公司要求在最近几年没有更新，请对照最新的法规更新和新的客户要求进行检查:
- 食品药品监督管理局:2004年工业指南-无菌加工生产的无菌药品
- 欧盟:2009年GMP卷4，附录11 -无菌药品的生产
- ISO 14644：洁净室和相关受控环境。注:2014年11月新批准版本
新vp监测系统必须满足所有审计员的要求。主要有两个方面值得关注:
- 报告:监视报告必须包括所有必需的信息:测量数据、报警事件、报警原因、执行每项操作的人员、审查人和批准人签名等。这些数据必须在合理的时间内(通常是30分钟到几个小时)为任何请求的批提供。
图6。批放行报告的样页 - 监控系统:监测系统本身经常被审计。审核员要审查警报限值和这些限值的基本原理、被监视的位置、何时执行监视、由谁执行监视、审计跟踪数据、数据安全和系统访问控制、系统验证文档等。
满足审计员的要求可能很耗时;确保可以从安全的数据库中快速、轻松地生成报告。
额外的需求
如果NVP系统允许在一段较长的时间内定期审查数据，则是有帮助的。长期报告可以帮助您确保警报限制是适当的，反映清洁度水平的改进，并可以显示重复发生相同的警报原因，允许潜在的工艺改进来改善颗粒控制。监测系统应有助于长期数据挖掘，以便不断改进工作。
总结
在工作流程和设施设计的早期考虑不可用颗粒监测系统的需求是最佳实践。NVP监测是现代隔离、自动化、无菌环境的重要组成部分，而不是事后才“拴上”的东西。自动化系统需要额外的时间来实现和验证。
成功实施自动化监控系统的关键在于正确分析无菌工作流程，识别风险，并定义适当的系统需求。用户需求规范是第一步。希望本文能帮助您开始。